Microscopie & macroscopie
Microscope droit équipé pour l’observation en lumière claire, fond noir, contraste de phase, contraste interférentiel différentiel, épifluorescence. L’Axioskop 2 permet de faire des observations à l’échelle tissulaire et cellulaire préalables ou non à l’analyse à l’échelle cellulaire au microscope confocal.
Equipement
- Lampe halogène HAL 100 pour l’observation en lumière claire et HBO 100 à lampe à vapeur de mercure HBO 103 W/2 pour une application en fluorescence.
- Objectifs 1,25x, 2,5x, 10x, 20x, 40x (air) et 63x (objectif à immersion dans l’huile).
- Filtres : Le microscope est équipé pour la fluorescence en lumière réfléchie (épifluorescence). Le faisceau d’excitation filtré est réfléchi par un miroir dichroïque puis focalisé sur la préparation par l’objectif. La préparation absorbe les rayons d’ondes courtes et émet un rayonnement fluorescent qui est à son tour capté par l’objectif et transmis par le miroir dichroïque. Elles traversent ensuite un filtre d’arrêt qui ne laisse passer que les rayons d’ondes longues alors transmises à l’observateur.
Emission vert (FITC, Alexa 488…) : EX 470/40 nm, EM 525/50 nm
Emission rouge (rhodamine, Alexa 555…) : EX 546/12 nm, EM 575-640 nm
Emission bleu (DAPI, Hoechst…) : EX 365 nm, EM 445-50 nm - Acquisition : caméra Zeiss Axiocam MRc (couleur), logiciel Zeiss AxioVision 3.0.
Applications
Histologie, immuno-histochimie, immuno-histofluorescence.
Microscope droit équipé pour l’observation en lumière claire et l’épifluorescence.
Equipement
- Lampe halogène HAL 100 (lumière claire) et luminaire HBO 100 (fluorescence).
- Objectifs 2,5x, 10x, 20x, 40x (air) et 100x (objectif à immersion dans l’huile).
- Filtres : bleu (DAPI, Hoechst…) : EX 365 nm, EM 445-50 nm ; Cyan : EX 435/20nm, EM 480/30nm ; vert (FITC, Alexa 488…) : EX 470/40 nm, EM 525/50 nm ; rouge (rhodamine, Alexa 555…) : EX 546/12 nm, EM 575-640 nm ; ultra-rouge : EX 640/30 nm, EM 690/50 nm
- Acquisition : caméra Hamamatsu NB Orca Flash LT Plus, logiciel d’acquisition Zen (Zeiss)
Applications
Histologie, immuno-histochimie, immuno-histofluorescence, prises de vues multiples, mosaïques, superposition d’images, reconstitution bi-dimentionnelle, stéréologie.
Microscope droit équipé pour l’observation en lumière claire et l’épifluorescence.
Equipement
- Lampe LED blanche pE-300 Lite.
- Objectifs 2,5x, 5x, 10x, 20x, 40x, 40x (immersion à huile) et 63x (immersion à huile).
- Filtres : bleu (DAPI, Hoechst) : EX 360/40, EM 460/50 ; vert (FITC, Alexa 488) : Ex BP 480/40 Em BP 527/30 ; orange (TRITC) : Ex BP 530-555 Em BP 595/25 ; rouge (Alexa 594) : Ex BP 515-560 Em LP 590 ; rouge lointain (Alexa 647) : Ex BP 620/60 Em BP 700/75
- Acquisition : camera Tucsen FL-20 BW, logiciel d’acquisition Mosaic 2.3 Tucsen.
Applications
Histologie, immuno-histochimie, immuno-fluorescence.
Le macroscope est un photomicroscope spécialisé, adapté à la photographie en lumière réfléchie. Il évite les aberrations photographiques associées aux stéréomicroscopes dont l’aspect extérieur est proche.
Equipement
- Lampe halogène HBO 103 W/2
- Objectif Apozoom 1 :6 x5,8 à x30
- Filtres : rouge (Cy3…) : EX 550 nm, EM 570 nm ; vert (Alexa 488…) : EX 488 nm, EM 520 nm.
- Acquisition : Caméra DFC Leica, logiciel FW4000 V1.2.1.
Applications
Prise de vue d’objets macroscopiques (cerveaux entiers, grandes coupes, etc….).
Responsable technique : Anne-Marie Haeberlé, IE CNRS
03 88 45 66 37
haeberle@inci-cnrs.unistra.fr
Les appareils Microscopes AXIOSKOP 2, AXIOIMAGER M2 et MACROSCOPE constituent un plateau technique de Microscopie Photonique ouvert aux membres statutaires et non statutaires de l’INCI. Leur entretien est financé par l’INCI. Leur accès est soumis à réservation préalable sur le site de l’Institut. L’accès n’est pas autorisé les jours fériés et en dehors des heures d’ouverture de l’Institut. Toute première utilisation requiert une autorisation nominative après vérification des capacités de l’utilisateur et formation à l’utilisation. Aucune formation à l’utilisation ne peut être dispensée à cet effet par autre que le personnel responsable sans concertation.
Toute utilisation doit être inscrite (date, durée et nom de l’utilisateur) sur le carnet associé à chaque microscope. Les réglages du microscope (filtres, diaphragmes, objectifs, platine) et du logiciel utilisés doivent être remis sur les positions standard après chaque utilisation. Aussi, la housse de protection doit être replacée sur le microscope après extinction. Aucun fichier ne peut rester enregistré sur le pilote des microscopes plus d’une semaine. Aucun objet personnel, lame histologique, document, produits, déchets… ne doit être abandonné sur place. Tout fichier ou matériel «abandonné» ou «oublié» sera détruit passé le délai réglementaire.
Tout contrevenant à ces simples dispositions se verra refuser l’accès aux microscopes.